1,3-1,4-β-葡聚糖酶廣泛應用于不同的工業領域中,尤其是動物飼料和釀造業。中國科學院天津工業生物技術研究所的郭瑞庭研究組和東莞泛亞太生技公司及臺灣基酵生技公司合作,成功獲得了來源于嗜熱真菌Paecilomycesthermophila的1,3-1,4-β-葡聚糖酶PtLic16A酶蛋白空結構及與底物的復合體結構。PtLic16A屬于糖苷水解酶GH16家族,最適溫度為70°C,熱穩定性好。其結構為典型的β-jelly-roll結構,表面形成凹槽結構,易于和底物的結合。
通過對底物復合體結構的深入分析,推測PtLic16A的水解作用機制與位于活性中心的E113、E118保守氨基酸密切相關,其中E113作為親核劑,E118作為質子供體以發揮作用。活性部位附近的芳香族氨基酸W97、W101、W108、W253和底物識別有關。通過定點突變研究,也證實了W108在底物識別、酶催化中占有關鍵的地位。
該研究為1,3-1,4-β-葡聚糖酶耐熱機理研究和改造提供了堅實基礎,更利于將來應用于其他工業領域中。該研究項目獲得工業酶國家工程實驗室及天津市專項的支持。
來源:中國食品報
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